化学发光
化学发光(CLIA)平台是利用抗原抗体之间的特异性反应来测定体内疾病标志物浓度,从而判断人体身体状态的诊断方法,广泛应用于传染病、心脏疾病、肿瘤、妊娠检测等体外诊断的检测。化学发光已经成为在免疫诊断中一种重要的检测方式。
CLIA主要有化学发光分析系统与免疫反应两部分构成。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化与氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子利用发光信号测量仪器测量光量子。免疫反应通常是抗体与样本中的被测物发生特异性反应,而标记在抗体上的发光物质或酶再通过酶促反应作用于发光底物,利用化学检测系统检测发光强度,最后通过化学发光标记物与发光强度的关系确定被测物的含量。如有需要,请联系我们
CLIA主要有化学发光分析系统与免疫反应两部分构成。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化与氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子利用发光信号测量仪器测量光量子。免疫反应通常是抗体与样本中的被测物发生特异性反应,而标记在抗体上的发光物质或酶再通过酶促反应作用于发光底物,利用化学检测系统检测发光强度,最后通过化学发光标记物与发光强度的关系确定被测物的含量。如有需要,请联系我们
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CLIA根据标记物的不同可分为三大类,即直接化学发光,酶促化学发光和电化学发光。
直接化学发光
化学发光剂直接标记到抗体或抗原的免疫测定方法称为化学发光免疫分析。直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需要酶的催化作用,直接参与发光反应,他们在化学结构上有产生发光的特有基团,可直接标记抗原或抗体,目前常见的直接化学发光标记物主要有吖啶酯和异鲁米诺。
直接化学发光速度快,试剂稳定性好,但灵敏度略低于酶促发光。
酶促化学发光
酶促化学发光免疫分析是以酶标记抗原或抗体进行免疫反应,反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光,用发光信号测试仪进行发光测定,酶的浓度决定了化学发光的强度。HRP与ALP为常用的标记酶,放光底物分别为鲁米诺,AMPPD等。
电化学发光
在电极上施加一定的电压或电流时,在点击电化学反应产物之间及点击反应产物与溶液中的某组分发生化学反应激发态,当激发态跃迁回基态时放出能量,此过程称之为电化学发光(ECL).该方法学主要的电化学发光剂三联吡啶钌。
三种化学发光方法的比较:
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以下夹心法为例,介绍化学发光平台中常用的磁珠类型。
羧基磁珠:
羧基磁珠通过一步法或两步法,在EDC与NHS的活化下,偶联捕获抗体。
氨基磁珠:
氨基磁珠在戊二醛或氰基硼氢化物的活化下偶联化学放光体系中的捕获抗体。
甲苯磺酰基磁珠:
甲苯磺酰基磁珠在硼酸与硫酸铵的缓冲液中可直接偶联捕获抗体
SA 偶联磁珠:
体外诊断企业为缩短产品研发周期,往往选择操作相对简单的SA 偶联磁珠。但SA 偶联磁珠的成本高,不利于企业降低成本,应对国家集采等政策带来的成本压力。 SA 偶联磁珠通过亲和结合力与生物素标记的捕获抗体结合。
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从新产品研究,工艺优化到自有工厂的大规模生产制造,佳淳诊断均能够按照客户的具体需求提供高质量且性能稳定的材料和方案,以达成时效性和成本效益。以下是佳淳诊断部分可开发的化学发光平台的相关指标。
◆ 优生优育
17α-羟孕酮
雌三醇
游离雌三醇
甲胎蛋白/人绒毛膜促性腺激素游离β亚基
◆ 甲状腺疾病
促甲状腺素
反三碘甲状腺原氨酸
◆ 心肌
B型脑钠肽
N-末端脑钠肽前体
超敏肌钙蛋白I
超敏肌钙蛋白T
可溶性生长刺激表达基因2蛋白
◆ 肿瘤
胸苷激酶1
高尔基体蛋白73
异常凝血酶原
◆ 糖尿病
脂联素
◆ 贫血
维生素B12
叶酸
◆ 高血压
醛固酮
血管紧张素Ⅰ
血管紧张素Ⅱ
◆ 骨代谢
25-羟基维生素D
N-MID骨钙素
β-胶原特殊序列
◆ 传染病
丙型肝炎病毒IgG抗体
丙型肝炎病毒核心抗原
丙型肝炎病毒抗体
呼吸道合胞病毒IgM抗体
梅毒螺旋体抗体
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体
乙型肝炎病毒前S1抗原
乙型肝炎病毒前S2抗原