佳淳诊断试剂（广东）有限公司

CDO: 侧向层析; 化学发光; 荧光定量PCR; 传染病检测; 肿瘤筛查; 优生优育; 宠物诊断

CDMO

IVD原料: 酶; DNA单体; dNTP; 磁珠微球

侧向层析

在POCT的技术中，应用最为广泛的是侧向流层析技术. 该技术出现于 20 世纪 80 年代初期的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的基础上建立的一种简单、快速的免疫学检测技术。

侧向层析免疫技术原理是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维素膜(NC 膜)上, 把标记过的另一抗原或抗体吸附在标记物垫上。当待测样品加到试纸条一端的样品垫上后, 通过毛细作用向前移动, 溶解标记物垫上的已经标记过的抗原或抗体后相互反应, 再移动至固定了抗原或抗体的区域时, 待测物和标记物反应后的复合物与之发生特异性结合而被截留, 聚集在检测带上, 通过可目测的显色标记物得到直观的结果。

侧向层析与酶联免疫吸附试验（ELISA）、实时荧光定量聚合酶链式反应（QPCR）等检测技术相比，具有简单、快速、不依赖大型仪器设备、价格低廉、操作人员不需要接受特别的培训等优势，被广泛应用于即时检验、现场检验以及家庭自检。因此近年来发展迅速，在食品安全、疾病诊断、毒品检测、环境监测等方面都有广泛的应用, 比如最常见的早早孕试纸、传染病快速诊断试剂盒, 新冠抗原和抗体快速检测试剂盒，都是基于侧向层析检测技术的原理.

侧向层析技术的如下优点使得其在各方面得到了广泛应用.
1. 一步检测，没有多余的清洗过程
2. 快速、低成本、少的样本量
3. 样本检测程序简单，易操作
4. 可以检测物质种类多，包括蛋白、半抗原、核酸、扩增产物等
5. 可直接进行液体样本的检测
6. 无需机器可判读定性和半定量的结果
7. 满足即时检测和床边检测
8. 长的产品效期，不需要低温保存，减少运输及保存成本

如有需要，请联系我们

侧向层析技术虽然已经得到广泛应用，但如何保证体外诊断产品满足法规要求，并呈现准确且重现性好的结果，仍需要专业的专家团队来进行系列的研发及工艺流程的优化。以下列举了在体外诊断产品开发过程中，影响侧向层析技术应用的相关技术指标。

硝酸纤维素膜（NC）的选择
如何将捕获分子持续、牢固的结合在检测线T和质控线C，是生产一个灵敏、可靠的免疫层析检测试剂的关键。同时，POCT厂商还可以结合自己的生产工艺对其性能(如灵敏度、特异性等)进行确认，从而选择一款满足实际生产需求的NC膜。

通常在研发过程中会从以下几个方面来选择合适的膜：
● 厚度：可采用测厚仪进行测量，在NC膜上选择几个点进行测量以考察其均匀性。厚度若不均匀，会导致划出来的C/T线宽窄不一。在捕获试剂用量不变的情况下，膜越厚C/T线越窄，反之亦然。
● 宽度：可采用普通直尺或游标卡尺测量。常用的幅宽有20mm和25mm两种规格，厂家可根据实际生产工艺的需求定制特殊的规格。
● 背衬：NC膜有无背衬和带背衬两种类型。由于材质本身特性，无背衬NC膜很脆，容易破裂。背衬的存在不但提高了NC膜强度，易于生产过程中的加工操作；同时，在其粘贴到PVC胶板后，背衬可以有效地阻隔胶内物质迁移进入NC膜，避免对性能造成影响。
● 爬速（膜孔径）： 目前，行业内统一采用爬速测试的方法来表征侧向流动方向的膜孔径。爬速可以用秒表测定纯化水从膜的底部通过毛细作用"爬"到4cm顶端所用的时间（s）得到。根据爬速的不同，NC膜一般可分为快流速、中流速和慢流速三类。流速越快，意味着孔径越大。
● 蛋白吸附：目前普遍认同的是，NC膜与蛋白的结合是彼此之间疏水作用力、氢键以及静电吸力三者共同作用的结果。蛋白与膜结合能力的强弱将直接影响检测灵敏度和C/T线的宽度。

一般来说，影响NC膜和蛋白结合的因素包括：
1）制膜材料本身的性质：不同厂家生产的NC膜虽然都是由硝酸纤维素制成，但是不同原材料在性能上存在一定差异，会导致与蛋白的结合能力有不所同。
2）比表面积：比表面积越大，意味着膜内聚合物表面积越大，可与蛋白进行结合位点越多，蛋白结合能力越强。
3) 表面活性剂的含量：表面活性剂对NC膜起到润湿的作用，但是浓度过高则可能会影响NC膜与蛋白的结合。

抗体对的优化
尽管试纸条的物理成分、构建技术和缓冲剂在优化测试中起着主要作用，但抗体对的选择仍是整个工艺的核心，需要精心筛选以确保抗体的亲和力，特异性及稳定性。由于单克隆抗体（大多来自于小鼠杂交瘤）的产量高，稳定性好，在体外诊断试剂的开发中广受科学家的追捧。

纳米粒子的选择
在选择纳米粒子时，首先要确定开发的诊断试剂的目标，定性或定量检测，多联检或单指标检测，以最终确定使用胶体金，乳胶微球抑或量子点，荧光微球等材料。当然，除此之外，还需要考虑所选的材料是否具备如下特点:
● 在各种条件和温度下溶液中的胶体稳定性；
● 在一个大的（和有用的）动态范围内的检测灵敏度；
● 共轭的效率和可重复性（不损失化学和生物的完整性和活性）；
● 缺乏或非常低的非特异性结合特性（确保高信噪比）；
● 合适成本以实现商业化；
佳淳诊断的专业团队，可以根据客户的实际需求，利用多年的产品开发经验为客户提供最专业的解决方案，并为客户解决如下困扰：
● 如果您的公司想要扩展技术平台，但现有的研发团队仍缺乏新技术平台的专业知识
● 如果您的公司计划进军全球市场，但仍缺乏了解国际市场的法规监管规则和市场准入门槛
● 如果您的团队想要优化工艺流程
● 如果你的新团队不完全理解法律法规，并面临因为对法律的误解而在中途停止研究，
● 如果您想利用现成的成熟且经验丰富的研发团队快速进入市场
● 如果您的公司期望降低由于缺乏市场理解可能造成的巨额投资的风险
● 如果您的团队向缩短研发团队建设的周期，
侧向层析POCT诊断产品为适应法规要求，保证产品检测结果的准确定及重现性，需要在开发时即严格把控产品质量及性能，以便产品开发后加速法规注册流程，快速完成中试测试及放大生产的转化，并进入商业化。

以下为侧向层析POCT产品在开发过程中需要进行检测的关键指标
● 阳性符合率
● 阴性符合率
● 最低检测限
● 重复性
● 批间差
● 稳定性(实时/加速/运输)
● 样本稳定性
● 特异性（分析相似检测靶标的干扰）
● 干扰分析（血红蛋白/甘油三酯/胆红素/内风湿因子/药物等）
● 其他定制化需求

试剂盒开发指标

◆ 心肌
肌钙蛋白I	肌酸激酶同工酶	肌钙蛋白I/髓过氧化物酶
肌钙蛋白T	心肌肌球蛋白结合蛋白C	肌钙蛋白I/ N-末端脑钠肽前体 /D-二聚体
超敏肌钙蛋白I	髓过氧化物酶	可溶性生长刺激表达基因2蛋白
超敏肌钙蛋白T	肌钙蛋白I/肌酸激酶同工酶	可溶性生长刺激表达基因2蛋白/N-末端脑钠肽前体

◆炎症
补体因子D	免疫球蛋白E	抗链球菌溶血素O IgG抗体
补体因子H	前白蛋白/C-反应蛋白
抗链球菌溶血素O	前列腺小体外泄蛋白

◆ 优生优育
雌二醇	抗子宫内膜抗体IgA	妊娠相关血浆蛋白A
促卵泡生成素	抗子宫内膜抗体IgG	胎儿纤维连接蛋白
催乳素	抗子宫内膜抗体IgM	胎盘生长因子
睾酮	抗人绒毛膜促性腺激素抗体	胎盘生长因子/可溶性fms样酪氨酸激酶-1
黄体生成素	抗透明带抗体	抑制素B
精子SP10蛋白	抗心磷脂/抗卵巢/抗子宫内膜/抗精子IgG抗体	游离β-人绒毛膜促性腺激素
抗精子IgA抗体	抗滋养层细胞膜抗体	甲胎蛋白
抗精子IgG抗体	泌乳素	人绒毛膜促性腺激素
抗精子IgM抗体	排卵期激素（LH和E3G）	β-人绒毛膜促性腺激素核心片段/人绒毛膜促性腺激素
抗卵巢抗体IgG	孕酮	甲胎蛋白/人绒毛膜促性腺激素游离β亚基
抗卵巢抗体IgM

◆ 自免疾病
胶质纤维酸性蛋白	抗链球菌溶血素O/类风湿因子/C-反应蛋白	抗心磷脂抗体IgG
抗dS-DNA抗体	抗磷脂酶A2受体抗体	抗心磷脂抗体IgM
抗M2型线粒体抗体	抗磷脂酶A2受体抗体IgG	抗中性粒细胞胞浆抗体
抗RA33抗体	抗双链DNA抗体	抗中性粒细胞胞浆抗体IgG
抗核抗体	抗双链DNA抗体IgG	抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA
抗环瓜氨酸多肽抗体	抗线粒体抗体IgA/G/M	类风湿因子IgG
抗环瓜氨酸多肽抗体/类风湿因子	抗线粒体抗体M2型	类风湿因子IgM
抗环瓜氨酸多肽抗体IgG	抗心磷脂抗体	免疫球蛋白G4
抗角蛋白抗体	抗心磷脂抗体IgA	血管炎自身抗体谱
抗可溶性抗原抗体

◆ 治疗药物
β-内酰胺类药物	氟喹诺酮类药物	林可酰胺类药物
苯妥英	环孢霉素	霉酚酸
丙戊酸	磺胺类药物	四环素类药物
茶碱	甲氨蝶呤	他克莫司
地高辛	卡马西平	万古霉素
伏立康唑	酰胺醇类药物

◆ 滥用药物检测
美沙酮
四氢大麻酚酸	氯胺酮	吗啡/甲基苯丙胺
安非他明	3,4 -亚甲二氧基甲基苯丙胺	吗啡/甲基安非他明
苯二氮卓	6-单乙酰吗啡	吗啡/甲基安非他明/氯胺酮
丁丙诺啡	吗啡/氯胺酮	吗啡/甲基安非他明/氯胺酮/亚甲二氧基甲基安非他明/可卡因
利培酮

◆ 传染病
A群链球菌抗原	肺炎支原体IgM/IgG抗体	马尔尼菲蓝状菌抗原
B群链球菌抗原	肺炎支原体IgM抗体	诺如病毒抗原
A型肉毒毒素	肺炎支原体抗原	破伤风毒素IgG抗体
B型葡萄球菌肠毒素	副流感病毒IgG抗体	腮腺炎病毒IgM抗体
EB病毒衣壳抗原IgA抗体	副流感病毒IgM抗体	沙眼衣原体抗原
EB病毒衣壳抗原IgM抗体	感染H7亚型禽流感病毒（2013）抗原	沙眼衣原体IgG抗体
EB病毒早期抗原IgG抗体	汉坦病毒IgM/IgG抗体	沙眼衣原体IgM抗体
O139群霍乱弧菌	汉坦病毒IgM抗体	肾综合征出血热病毒IgM抗体
O1群霍乱弧菌	汉坦病毒IgG抗体	嗜肺军团菌IgG抗体
埃可病毒IgM抗体	呼吸道合胞病毒抗原	水痘-带状疱疹病毒IgM抗体
丙型肝炎病毒IgG抗体	甲型肝炎病毒IgG抗体
丙型肝炎病毒核酸	甲型流感病毒/乙型流感病毒/呼吸道腺病毒/呼吸道合胞病毒抗原	细小病毒B19IgG抗体
布鲁氏菌抗体	解脲支原体IgG抗体	细小病毒B19IgM抗体
布鲁氏菌抗原	解脲支原体IgM抗体	乙型肝炎病毒e抗体
肠道病毒71型核酸	柯萨奇B组病毒IgG抗体	乙型肝炎病毒e抗原
登革病毒IgG/IgM抗体	柯萨奇B组病毒IgM抗体	乙型肝炎病毒表面抗体
登革病毒NS1抗原	柯萨奇病毒A16型IgM抗体	乙型肝炎病毒表面抗原/表面抗体/e抗原/e抗体/核心抗体
登革病毒NS1抗原/IgG抗体/IgM抗体	狂犬病病毒IgG抗体	乙型肝炎病毒核酸
发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体	淋球菌抗原	乙型肝炎病毒核心抗体
肺炎链球菌抗原	淋球菌/沙眼衣原体抗原	乙型肝炎病毒核心抗体IgM
肺炎衣原体IgG抗体	A型流感病毒IgM抗体	乙型肝炎病毒前S1抗原
肺炎衣原体IgM抗体	A型流感病毒IgM抗体/B型流感病毒IgM抗体/副流感病毒IgM抗体	乙型肝炎病毒前S2抗原
肺炎衣原体IgM抗体/肺炎支原体IgM抗体	麻疹病毒IgG抗体	戊型肝炎病毒IgG抗体
肺炎支原体IgG抗体	麻疹病毒IgM抗体

◆ 优生优育
Ⅰ型单纯疱疹病毒IgM抗体	风疹病毒IgM抗体	弓形虫IgM/IgG抗体、巨细胞病毒IgM/IgG抗体、风疹病毒IgG抗体
Ⅱ型单纯疱疹病毒IgG抗体	弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ型/Ⅱ型IgG抗体	巨细胞病毒IgG抗体
Ⅱ型单纯疱疹病毒IgM抗体	弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ型/Ⅱ型IgM抗体	巨细胞病毒IgM抗体
Ⅱ型单纯疱疹病毒抗体(IgM/IgG)	弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体联合	抗单纯疱疹病毒II型IgM抗体
东南亚缺失型α-地中海贫血Zeta链蛋白	弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型IgM抗体联合	麻疹病毒IgG抗体/风疹病毒IgG抗体/腮腺炎病毒IgG抗体
风疹病毒IgG抗体
游离前列腺特异性抗原

◆ 肿瘤
α淋巴毒素	便潜血	血管内皮生长因子
癌胚抗原	壳多糖3样蛋白1	高尔基体蛋白73
甲胎蛋白	前列腺特异性抗原	糖类抗原153

◆ 妇科疾病
白色念珠菌	白色念珠菌抗原	白色念珠菌/阴道毛滴虫/加德纳杆菌抗原
阴道加德纳菌	阴道毛滴虫抗原	白色念珠菌/阴道毛滴虫抗原

◆ 肝功
Ⅲ型前胶原	Ⅳ型胶原	甘胆酸
Ⅲ型前胶原N端肽	层粘连蛋白	透明质酸

◆ 肾功能
β2-微球蛋白	肾损伤分子1	微量白蛋白
胱抑素C	视黄醇结合蛋白	微量白蛋白/肌酐

◆ 甲状腺疾病
促甲状腺素	甲状腺素	三碘甲状腺原氨酸
甲状腺球蛋白	游离甲状腺素	游离三碘甲状腺原氨酸

◆ 临床微生物
利奈唑胺	金黄色葡萄球菌	炭疽杆菌抗原
沙门氏菌抗原	革兰氏阳性需氧菌

◆ 凝血
凝血酶激活纤溶抑制物	纤维蛋白（原）降解产物

◆ 贫血
维生素B12	血红蛋白

◆ 糖尿病
C-肽	抗胰岛素抗体	血糖
C肽/胰岛素	糖化血红蛋白	胰岛素

◆ 过敏症
尘螨过敏原	食物特异性IgG抗体

◆ 消化道疾病
乳铁蛋白	钙卫蛋白	钙卫蛋白/乳铁蛋白

◆ 高血压
皮质醇	肾素	促肾上腺皮质激素
醛固酮

◆ 炎症
免疫球蛋白E

◆ 骨代谢
总维生素D	β-胶原降解产物	Ⅰ型胶原氨基端延长肽

◆ 胰腺疾病
胰腺弹性蛋白酶1	胰蛋白酶原-2

◆ 阿尔茨海默症
β淀粉样蛋白	阿尔茨海默相关神经丝蛋白

◆ 新生儿筛查
胰岛素样生长因子结合蛋白-1	胰岛素样生长因子结合蛋白-1/胎儿纤维连接蛋白

◆ 血脂
总胆固醇

◆ 心血管疾病
脂蛋白（a）

◆ 脑损伤
S100-β蛋白

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